Ang Javascript gina-disable subong sa imo browser. Ang iban nga mga bahin sini nga website indi mag-obra kon ang javascript gina-disable.
Magrehistro upod ang imo partikular nga mga detalye kag partikular nga droga nga interesado kag ipaanggid namon ang impormasyon nga imo ginhatag sa mga artikulo sa amon malapad nga database kag i-email ang PDF nga kopya sa imo gilayon.
Ang mga granules sang Ban-Lan-Gen nagapahaganhagan sang dextran sodium sulfate-induced chronic relapsing colitis sa mga ilaga paagi sa pag-modulate sang gut microbiota kag pagpanumbalik sang intestinal SCFA Derived-GLP-1 production
Jiao Peng,1-3,*Li Xi,4,*Zheng Lin,3,5 Duan Lifang,1 Gao Zhengxian,2,5 Diehu,1 Li Jie,6 Li Xiaofeng,6 Shen Xiangchun,5 Xiao Haitao21Peking University Shenzhen Hospital Department of Pharmacy, Shenzhen, Republics of China; 2Shenzhen University Health Science Center School of Pharmacy, Shenzhen, People's Republic of China; 3Guizhou Medical University Engineering Technology Research Center of Ethnic Medicine and Traditional Chinese Medicine Development and Application Ministry of Education, Guizhou Provincial Key Laboratory of Pharmacy, Guizhou Medical University , Guiyang, People's Republic of China; 4 Departamento sang Gastroenterology, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen, People's Republic of China; 5 School of Pharmacy, Guizhou Medical University, State Key Laboratory of Medicinal Plant Function and Application, Guiyang; 6 Department of Laboratory Medicine, Peking University Shenzhen Hospital, Shenzhen, China [email protected] Shen Xiangchun, School of Pharmacy, Guizhou Medical University, Guizhou, People's Republic of China, 550004, Email [email protected] Objective: Ang GLP-1-based nga terapiya isa ka bag-o nga opsyon sa pagbulong sang inflammatory bowel disease para sa bowel disease-Blean-Blean. Ang (BLG) granules isa ka kilala nga antiviral TCM nga pormulasyon nga nagapakita sang potensyal nga anti-inflammatory nga aktibidad sa pagbulong sang nagkalainlain nga mga kondisyon sang panghubag. Apang, ang anti-inflammatory nga epekto sini sa colitis kag ang mekanismo sang aksyon sini indi pa maathag. MGA PAMAAGI: Sa pagtukod sang dextran sodium sulfate (DSS)-induced chronic colpsing relactivity sa isa ka ilaga. ang mga indeks, mga marker sang histological sang pilas, kag mga lebel sang proinflammatory cytokine ginhimo sa pag-usisa sang proteksyon nga epekto sang BLG. Ang mga epekto sang BLG sa gut microbiota kag gut ginkilala paagi sa serum GLP-1 nga lebel kag colonic GLP-1 nga ekspresyon, gut microbiota nga komposisyon, fecal SC nga lebel, kag primary GLP-release gikan sa primary mouse colonic epithelial cells SCFA-derived GLP-1 production.Mga Resulta: Ang pagtambal sang BLG nagpanubo sing daku sang pagbuhin sang timbang sang lawas, DAI, pagpalip-ot sang colon, pagkaguba sang tisyu sang colon, kag lebel sang proinflammatory cytokine sang TNF-α, IL-1β, kag IL-6 sa tisyu sang colon. Dugang pa, ang pagbulong sang BLG makabulig sing daku sa pagpanumbalik sang GPR14 GPR. kag GRP43 nga ekspresyon kag serum GLP-1 nga lebel sa mga ilaga nga may colitis, kag paagi sa pagdugang sang SCFA-producing bacteria pareho sang Akkermansia kag Prevotellaceae_UCG-001, kag pagnubo sang kadamuon sang bakterya pareho sang Eubacterium_xylanophilum_group, Ruminococcaceae_UCG-104, Imonantes kag Imonas Bacteris. Dugang pa, ang pagtambal sang BLG makadugang sing daku sang lebel sang SCFAs sa mga higko sang mga ilaga nga may colitis. Sa amo man nga tion, ang mga eksperimento sa vitro nagpakita man nga ang fecal extract sang mga ilaga nga ginabulong sang BLG makapukaw sing daku sa panguna nga magagmay nga mga selula sang epithelial sang colon sang Murine nga nagapaguwa sang GLP-1. Mga konklusyon: Ini nga mga natukiban nagapakita nga ang BLG may epekto sa anti-colitis. Ang BLG may potensyal nga mapalambo bilang isa ka terapiya, sa dimagkubos sa bahin paagi sa pag-modulate sang gut microbiota kag pagpanumbalik sang intestinal SCFA-derived GLP-1 production Nagasaad nga mga bulong para sa chronic relapsing colitis. Mga yabi nga tinaga: colitis, Ban-Lan-Gen granules, gut microbiota, short-chain fatty acids, GLP-1
Ang ulcerative colitis (UC) isa ka malawig nga panghubag nga balatian sang colon kag rectum nga ginakilala paagi sa nagabalikbalik nga pag-ubo, kasakit sa tiyan, pagniwang, kag mucopurulent bloody stools.1 Sining karon lang, ang paglapnag sang UC nagadamo sa mga pungsod nga manubo ang insidente sang una, lakip na ang China, nga may nagadamo nga pagkapopular sang estilo sang pagkabuhi sa Nakatundan 22. nagahatag sang dalagku nga mga problema para sa ikaayong lawas sang publiko kag may daku nga implikasyon sa ikasarang sang mga pasyente sa pagtrabaho kag kalidad sang kabuhi. Talalupangdon, ang pathogenesis sang UC nagapabilin nga indi maathag, apang ginabaton sa kabilugan nga ang genetika, mga butang sa palibot, ang gut microbiota, kag ang sistema sang imyunidad tanan nagaamot sa pag-uswag sang UC.3 Bisan karon, wala sing bulong para sa UC, kag ang pagbulong sang UC nagakadto sa klinikal nga pagkontrol, sa klinikal nga mga sintomas mag-induce kag magmentinar sang remission, magpasanyog sang pag-ayo sang mucosal, kag magpanubo sang pagbalik.Ang mga klasikal nga pagbulong nagalakip sang aminosalicylates, corticosteroids, immunosuppressants, kag biologics.Apang, ining mga bulong indi makalab-ot sang ginahandum nga epekto bangod sang ila nagkalainlain nga mga epekto.4 Sining karon lang, madamo nga mga pagtuon sa kaso ang nagapakita nga ang tradisyonal nga medisina sang China (MTC) nagapakita nga ang tradisyonal nga medisina (MTC) ang potensyal sa pagbulig sa pag-ayo sang UC nga may manubo nga toxicity, nga nagapakita nga ang paghimo sang bag-o nga mga terapiya sa TCM isa ka nagapanaad nga estratehiya sa pagbulong para sa UC.5-7�
Ang Banlangen Granules (BLG) isa ka tradisyonal nga paghanda sang bulong sang mga Intsik nga human sa tubig nga ginkuha sang gamot sang Banlangen.8 Magluwas sa iya antiviral nga pagkaepektibo, ang BLG nagapakita sang potensyal nga anti-inflammatory nga aktibidad sa pagbulong sang nagkalainlain nga mga kondisyon sang pagpanghubag.9,10 Dugang pa, ang mga glucosinolates (R,S-goitrin, progoitrin, progoitrin, kag glucobin kag epiproside gin-isolate nakilala gikan sa mga aqueous extracts sang Radix isatidis) kag nucleosides (hypoxanthine, adenosine, uridine kag guanosine) kag indigo alkaloids pareho sang indigo kag indirubin.11,12 Ang mga nauna nga pagtuon nagdokumento sing maayo nga ang mga compound nga adenosine, uridine kag indirubin nagapakita sang mabaskog nga mga epekto sa anti-colitis sa nagkalainlain nga mga modelo sang collitis sa mga sapat sang nagkalainlain nga mga sapat. Apang, wala sing mga pagtuon nga nakabase sa ebidensya ang ginhimo sa pag-ebalwar sang pagkaepektibo sang BLG sa colitis. Sa karon nga pagtuon, gin-usisa namon ang proteksyon nga epekto sang BLG sa dextran sodium sulfate (DSS)-induced chronic relapsing colitis sa C57BL/6 nga mga ilaga kag nakita nga ang oral nga pagdumala sang BLG makahulugan nga nag-atenual sang DSS-induced chronic relapsing colp Ang panghubag, ang mga mekanismo sini sa regulasyon may kaangtanan sa modulasyon sang gut microbiota kag pagpanumbalik sang gut-derived glucagon-like peptide-1 (GLP-1) nga produksyon.
Ang mga granules sang BLG (wala sing asukar, gin-aprubahan sang NMPA Z11020357; Beijing Tongrentang Technology Development Co., Ltd., Beijing, China; numero sang batch: 20110966) ginbakal gikan sa mga botika. DSS (Molecular Weight: 36,000–000,000) ginbakal gikan sa DSS (Molecular Weight: 36,000–00,000) MP Biologicals (Santa Ana, USA). Ang Sulfasalazine (SASP) (≥ 98% nga kaputli), hematoxylin kag eosin ginbakal gikan sa Sigma-Aldrich (St. Louis, MO, USA). Ang mga mouse TNF-α, IL-1β kag IL-6 luminex Elisa assay kits ginbakal gikan sa R&D system (Minetic, MNAcetic, USA). propionic acid, kag butyric acid ginbakal gikan sa Aladdin Industries (Shanghai, China).2-Ethylbutyric acid ginbakal gikan sa Merck KGaA (Darmstadt, Germany).
6-8-semana nga lalaki nga C57BL/6 nga mga ilaga (bug-at sang lawas 18-22 g) ang ginbakal gikan sa Beijing Wetahe Laboratory Animal Technology Co., Ltd. (Beijing, China) kag ginbutang sa isa ka palibot nga 22 ± 2 °C nga may 12 h nga light/ dark cycle ginpakaon sang ilaga nga may isa ka sulundan nga ilimnon nga tubig nga may isa ka sulundan nga ilimnon nga ilaga. semana agud makapasibu sa bag-o nga palibot. Ang mga ilaga dayon gintunga sa apat ka grupo: grupo sang kontrol, grupo sang modelo sang DSS, grupo nga ginabulong sang SASP (200 mg/kg, oral) kag grupo nga ginabulong sang BLG (1 g/kg, oral). Subong sang ginapakita sa Figure 1A, suno sa amon nauna nga pagtuon, ang eksperimento nga chronic relapsing colitis gin-induce sang tatlo ka siklo sang DSS para sa 18% sang DSS. 5 ka adlaw, nga ginsundan sang distilled water sa sulod sang 7 ka adlaw, suno sa amon nauna nga pagtuon.18 Ang mga ilaga sa SASP kag BLG nga ginbulong nga mga grupo ginbulong sang SASP kag BLG, sa magkatuhay, kada adlaw sugod sa adlaw 0. Suno sa una nga mga eksperimento, ang dosis sang BLG gintalana sa 1 g/kg. Samtang, ang dosis sang SASP gintalana sa 20/kg ang literatura.4 Ang kontrol kag DSS nga mga grupo sang modelo nakabaton sang pareho nga kadamuon sang tubig sa bug-os nga eksperimento.
Ang Figure 1 Ang BLG nagapaayo sang DSS-induced chronic relapsing colitis sa mga ilaga. (A) Eksperimental nga desinyo sang chronic recurrent colitis kag pagbulong, (B) pagbag-o sang kabug-aton sang lawas, (C) disease activity index (DAI) score, (D) colon length, (E) representative image sang colon, (F) H&E staining Colon (100) (G score.Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 6).##p < 0.01 ukon ###p < 0.001 vs control (Con) nga grupo; *p < 0.05 ukon **p < 0.01 ukon ***p < 0.001 batok sa grupo sang DSS.
Ang kabug-aton sang lawas, pagkapareho sang higko, kag pagdugo sa rectum ginrekord adlaw-adlaw. Ang indeks sang aktibidad sang balatian (DAI) napat-od paagi sa pagtingob sang mga marka sang kabug-aton sang lawas, pagkapareho sang higko, kag pagdugo sa rectum subong sang ginlaragway na.19 Sa katapusan sang eksperimento, ang tanan nga mga ilaga gin-euthanize kag ang dugo, higko kag colon gintipon para sa dugang nga mga eksperimento.
Ang tisyu sang colon gin-fix sang formalin kag ginsulod sa paraffin. Ang 5-micron nga mga seksyon ginhimo kag gin-stain sang hematoxylin-eosin (H&E), dayon ginbulag kag gin-iskor suno sa ginlaragway na.
Ang kabug-usan nga RNA sang tisyu sang colon ginkuha paagi sa Trizol reagent (Invitrogen, Carlsbad, CA), nga ginsundan sang pagkuha sang cDNA gamit ang reverse transcriptase (TaKaRa, Kusatsu, Shiga, Japan). Ang quantitative PCR ginhimo gamit ang real-time PCR system nga may SYBR Green Master (Roche, Basel, Switzerland, Switzerland gin-normalize ang mga gene-transcript sa β). ang mga datos gin-analisar gamit ang 2-ΔΔCT nga pamaagi. Ang mga gene primer sequences makita sa Table 1.
Ang panguna nga mouse colonic epithelial cell isolation kag kultura ginhimo suno sa ginlaragway na.20 Sa malip-ot, ang mga colon sang 6-8 ka semana nga mga ilaga una nga gin-excise pagkatapos sang sakripisyo paagi sa cervical dislocation, dayon ginbuksan sing longitudinal, ginbulong gamit ang Hanks Balanced Salt Solution (HBSS, nga wala sing calcium kag magnesium) kag gamay nga cut of 50 mm. mga pidaso. Pagkatapos, ang mga tisyu gintunaw gamit ang 0.4 mg/mL collagenase XI (Sigma, Poole, UK) sa libre nga DMEM medium kag gin-centrifuge sa 300 xg sa sulod sang 5 min sa temperatura sang kwarto. I-resuspend ang pellet sa DMEM medium (gindugangan sang 10% fetal serum bovinenic, 100/000 units, kag peillin 100 μg/mL streptomycin) sa 37 °C kag mag-agi sa isa ka nylon mesh (kadakuon sang buho ~250 μm). Ang mga aliquot sang mga selula sang colonic epithelial ginbutang sa mga pinggan nga may idalom nga bildo kag gin-incubate upod ang acetic acid, propionic acid, butyric acid, kag fecal extract sang ilaga sa sulod sang 23 °C, 27 °C 5% CO2.
Ang tisyu sang colon gin-homogenize gamit ang PBS, kag ang lebel sang mga cytokines IL-6, TNF-α kag IL-1β sa tisyu sang colon natukiban gamit ang luminex ELISA assay kits (R&D systems, Minneapolis, MN, USA). Subong man, ang lebel sang GLP-1 sa serum kag culture medium sang panguna nga mga selula sang murine colonial napat-od ELISA kit (Bioswamp, Wuhan, China) suno sa mga instruksyon sang manufacturer.
Ang kabug-usan nga DNA gikan sa mga higko ginkuha gamit ang DNA extraction kit (Tiangen, China). Ang kalidad kag kadamuon sang DNA gintakus sa mga ratio sang 260 nm/280 nm kag 260 nm/230 nm, sa magkatuhay. Pagkatapos, gamit ang tagsa ka ginkuha nga DNA bilang isa ka sulundan, ang partikular nga mga primer 338F (ACCCGGGA) kag GCAGGA86 (GGACTACHVGGGTWTCTAAT) gingamit sa pagpadaku sang V3-V4 nga mga rehiyon sang 16S rRNA gene sa nagkalainlain nga mga rehiyon. Ang mga produkto sang PCR gintinluan gamit ang QIAquick Gel Extraction Kit (QIAGEN, Germany), gin-quantify paagi sa real-time PCR, kag gin-sequence gamit ang IlluminaMiseq PE300 sequencing platform (Fillumination, USA). ang pag-analisar sang bioinformatics, ang pagproseso sang datos ginhimo suno sa mga nauna nga ginreport nga mga protocol.21,22 Sa malip-ot nga pulong, gamita ang Cutadapt (V1.9.1) sa pagsala sang mga hilaw nga express file. Ang mga OTU gin-cluster gamit ang UPARSE (bersyon 7.0.1001) nga may similarity cutoff nga 97%, kag ang UCHIME gingamit sa pagkuha sang chimer sequence classification kag pag-analisar sang komunidad. ginhimo gamit ang RDP classifier (http://rdp.cme.msu.edu/) base sa SILVA ribosomal RNA gene database.
Ang lebel sang short-chain fatty acids (acetic acid, propionic acid, kag butyric acid) gintakus suno sa ginlaragway na ni Tao et al., nga may pila ka mga pagbag-o.23 Sa malip-ot, 100 mg sang mga higko ang una nga ginsuspinde sa 0.4 mL sang deionized water, nga ginsundan sang 0.1 mL sang 50% sang sulfuric acid kag 50 mL sang sulfuric acid. 2-ethylbutyric acid (internal standard), dayon gin-homogenize kag gin-init sa 4°C. Centrifuge sa 12,000 rpm sa sulod sang 15 minutos sa C. Ang supernatant ginkuha gamit ang 0.5 mL sang ether kag gin-indyeksion sa GC para sa pag-analisar. Para sa pag-analisar sang gas chromatography (GC), ang mga sample gin-analisar gamit ang GC-2010 Plus gas chromatograph (Shimadzu, Inc) nga may detector sang kalayo. (FID). Ang pagbulagay natigayon gamit ang isa ka ZKAT-624 nga haligi, 30 m × 0.53 mm × 0.3 μm (Lanzhou Zhongke Antai Analytical Technology Co., Ltd., China). Ang mga datos nakuha gamit ang GC solution software (Shimadzu, Inc.). Ang ratio sang split amo ang carrier 10: 10, ang nitrogen, kag ang carrier amo ang gas, kag ang carrier amo ang nitroheno, kag ang carrier amo ang gas. ang kadasigon sang pag-ilig 6 mL/min. Ang kadamuon sang pag-indyeksion 1 μL. Ang temperatura sang injector kag detector 300°C. Ang temperatura sang hurno ginhuptan sa 140°C sa sulod sang 13.5 minutos, dayon gindugangan sa 250°C sa kadasigon nga 120°C/min; ang temperatura ginhuptan sa sulod sang 5 ka minuto.
Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± standard error of the mean (SEM). Ang kahulugan sang datos gin-usisa paagi sa one-way ANOVA nga ginsundan sang Duncan's multiple range test. Ang GraphPad Prism 5.0 software (GraphPad Software Inc., San Diego, CA, USA) gingamit para sa tanan nga mga kalkulasyon kag ang p < 0.05 ginkabig nga statistically significant.
Nahibaluan gid nga ang UC isa ka chronic relapsing colitis disease nga may grabe nga kasakit sa tiyan, pag-ubo kag pagdugo. Gani, ang DSS-induced chronic relapsing colitis sa mga ilaga gintukod sa pag-ebalwar sang anti-colitis nga pagkaepektibo sang BLG (Fig. 1A). Kon ipaanggid sa control group, ang mga ilaga sa DSS nga grupo may mas mataas nga kabug-aton kag mas mataas nga kabug-aton sang lawas DAI, kag ini nga mga pagbag-o nangin baliskad pagkatapos sang 24 ka adlaw nga pagbulong sang BLG (Figure 1B kag C). Ang pagpalip-ot sang colon isa ka importante nga tanda sang UC. Subong sang ginapakita sa Figures 1D kag E, ang kalabaon sang colon sang mga ilaga nga nakabaton sang DSS nangin malip-ot, apang nahaw-asan sang pagbulong sang BLG. Ang masunod, ginhimo ang histolohikal nga pag-analisar sa pag-usisa sang colonic inflammation.H&E stained images kag pathological scores nagpakita nga ang DSS administration makahulugan nga nagtublag sa colonic architecture kag nagresulta sa pagkaguba sang crypt, samtang ang BLG nga pagtambal makahulugan nga nagbuhin sang crypt destruction kag pathological scores (Figure 1F kag G). Talalupangdon, ang proteksyon nga epekto sang BLG sa dosis nga 1 g/Kg kaanggid sa dosis sang SASP20 mg/Kg. Sa kabilugan, ining mga natukiban nagapakita nga ang BLG epektibo sa pagpanubo sang kagrabe sang DSS-induced chronic relapsing colitis sa mga ilaga.
Ang TNF-α, IL-1β kag IL-6 importante nga mga marker sang panghubag sang colon. Subong sang ginapakita sa Figure 2A, ang DSS nag-induce sang isa ka daku nga pagtaas sa gene expression sang TNF-α, IL-1β kag IL-6 sa colon kon ipaanggid sa control group. Ang pagdumala sang BLG mahimo nga makabalikid sing daku sa sini nga mga pagbag-o nga ginpatunga sang DSS, gingamit namon ang lebel sang ELISA. ang mga inflammatory cytokines TNF-α, IL-1β, kag IL-6 sa tisyu sang colon. Ang mga resulta nagpakita man nga ang lebel sang colonic sang TNF-α, IL-1β, kag IL-6 nagtaas sing daku sa mga ilaga nga ginbulong sang DSS, samtang ang pagbulong sang BLG nagpahaganhagan sining mga pagtaas (Figure 2B).
Figure 2 Ang BLG nagapugong sang gene expression kag produksyon sang proinflammatory cytokines TNF-α, IL-1β kag IL-6 sa colon sang mga ilaga nga ginabulong sang DSS. (A) Colonic gene expression sang TNF-α, IL-1β kag IL-6; (B) lebel sang protina sa colonic sang TNF-α, IL-1β kag IL-6. Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 4–6).#p < 0.05 ukon ##p < 0.01 ukon ###p < 0.001 vs control (Con) nga grupo; *p < 0.05 ukon **p < 0.01 batok sa DSS nga grupo.
Ang intestinal dysbiosis importante sa pathogenesis sang UC.24 Agod usisaon kon bala ang BLG naga-modulate sang gut microbiota sang mga ilaga nga ginabulong sang DSS, ang 16S rRNA sequencing ginhimo sa pag-analisar sang komunidad sang bakterya sang mga kaundan sang tinai. Ang Venn diagram nagapakita nga ang tatlo ka grupo nagapaambit sang 385 OTUs.A sa pareho nga tion, ang tagsa ka grupo may pinasahi nga OTU (Figs. 3A).Dugang pa, ang Chao1 index kag Shannon index nga ginapakita sa Figure 3B kag C nagpakita nga ang pagkananuhaytuhay sang komunidad sang gut microbiota nagnubo sa mga ilaga nga ginbulong sang BLG, bangud ang Shannon index nagnubo sing daku sa grupo nga ginbulong sang BLG. Ang panguna nga pag-analisar sang sangkap (PCA) kag ang panguna nga pag-analisar sang koordinasyon (PCA) gingamit sa pagdeterminar sang tatlo ka cluster patter mga grupo kag nagpakita nga ang istruktura sang komunidad sang mga ilaga nga ginbulong sang DSS maathag nga nahamulag pagkatapos sang pagbulong sang BLG (Figure 3D kag E). Ini nga mga datos nagapakita nga ang pagbulong sang BLG nakaapekto sing daku sa istruktura sang komunidad sang mga ilaga nga may DSS-induced colitis.
Ang Figure 3 BLG nagabag-o sang pagkananuhaytuhay sang gut microbiota sa mga ilaga nga may DSS-induced colitis. (A) Venn diagram sang OTU, (B) Chao1 index, (C) Shannon's richness index, (D) Principal Component Analysis (PCA) score plot sang OTU, (E) OTU Principal Coordinate Analysis score (PCA) Figure. Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 6).**p < 0.01 vs DSS group.
Agod mahibaluan ang partikular nga mga pagbag-o sa fecal microbiota, gin-analisar namon ang komposisyon sang gut microbiota sa tanan nga lebel sang taxonomic. Subong sang ginapakita sa Figure 4A, ang panguna nga phyla sa tanan nga grupo amo ang Firmicutes kag Bacteroidetes, nga ginasundan sang Verrucomicrobia. Ang relatibo nga kadamuon sang Firmicutes kag Firmicutes/Bacteroidetes nagtaas sing daku sa mga feo mga komunidad sang mikrobyo sang mga ilaga nga ginbulong sang DSS kon ipaanggid sa mga ilaga nga kontrol, kag ini nga mga pagbag-o nangin baliskad pagkatapos sang pagbulong sang BLG. Sa partikular, ang pagbulong sang BLG nagpataas sing daku sang relatibo nga kadamuon sang Verrucobacterium sa mga higko sang mga ilaga nga may DSS-induced colitis. Sa lebel sang panimalay, ang mga komunidad sang mikrobyo nga higko gin-okupar sang Lachnoa, Muribaculaceae, Akkermansiaceae, Ruminococcaceae kag Prevotellaceae (Fig. 4B). Kon ipaanggid sa grupo sang DSS, ang pag-ubos sang BLG nagdugang sang kadamuon sang Akkermansiaceae, apang nagnubo ang kadamuon sang Lachnospiraceae kag Ruminococcaceae. Talalupangdon, ang lebel sang microbical fetaceae amo ang microbical fetaceae. gina-okupar sang Lachnospira_NK4A136_group, Akkermansia kag Prevotellaceae_UCG-001 (Fig. 4C). Ini nga pagtukib nagpakita man nga ang pagbulong sang BLG epektibo nga nagbaliskad sang indi balanse nga microbiota bilang sabat sa hangkat sang DSS, nga ginakilala paagi sa pagnubo sang Eubacterium_xylalanophilumnogroup, Ruminococcaceae_UCG-014, Intestinimonas kag Oscillibacter, kag ang pagdugang sa Akkermansia kag Prevotellaceae_UCG-001.
Ang Figure 4 Ang BLG nagabag-o sang kadamuon sang gut microbiota sa DSS-induced colitis nga mga ilaga. (A) Kadamuon sang gut microbiota sa lebel sang phylum; (B) Kadamuon sang gut microbiota sa lebel sang pamilya; (C) Kadamuon sang gut microbiota sa lebel sang genus. Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 6).#p < 0.05 ukon ###p < 0.001 vs control (Con) nga grupo; *p < 0.05 ukon **p < 0.01 ukon ***p < 0.001 batok sa grupo sang DSS.
Kon binagbinagon nga ang short-chain fatty acids (SCFAs) amo ang mayor nga mga metabolite sang Akkermansia kag Prevotellaceae_UCG-001, samtang ang acetate, propionate kag butyrate amo ang pinakamadamo nga SCFAs sa intestinal lumen, 25-27 yara pa kita sa aton pagtuon. Subong sang ginapakita sa Figure 5, fecal fecate, butyrate, butyrate concentrations ang daku nga pagnubo sa grupo nga ginabulong sang DSS, samtang ang pagbulong sang BLG mahimo nga makapugong sa sini nga pagnubo.
Pigura 5. Ang BLG nagapataas sang lebel sang SCFAs sa mga higko sang mga ilaga nga may DSS-induced colitis. (A) Ang kaundan sang acetic acid sa mga higko; (B) kaundan sang propionic acid sa mga higko; (C) butyric acid content sa feces. Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 6).#p < 0.05 ukon ##p < 0.01 vs control (Con) nga grupo; *p < 0.05 ukon **p < 0.01 batok sa DSS nga grupo.
Dugang pa namon nga ginkalkulo ang Pearson correlation coefficient sa tunga sang genus-level differential SCFA kag fecal microbiota. Subong sang makita sa Figure 6, ang Akkermansia positibo nga may kaangtanan sa produksyon sang propionic acid (Pearson = 0.4866) kag butyric acid (Pearson = 0.6192 Sa kabaliskaran, ang Enteromonast kag Ocillocs pareho nga negatibo). nga may kaangtanan sa produksyon sang acetate, nga may Pearson coefficients nga 0.4709 kag 0.5104, sa magkatuhay. Subong man, ang Ruminococcaceae_UCG-014 negatibo nga may kaangtanan sa produksyon sang propionic acid (Pearson = 0.4508) kag butyric acid (Pearson = 0.4508), sa magkatuhay.
Figure 6 Pearson correlation analysis sa tunga sang differential SCFAs kag colonic microbes.(A) Enteromonas nga may acetic acid; (B) Concussion bacillus nga may acetic acid; (C) Akkermansia vs propionic acid; (D) Ruminococcus_UCG-014 nga may propionic acid; (E) Akkermansia nga may butyric acid; (F) ) Ruminococcus _UCG-014 nga may butyric acid.
Ang Glucagon-like peptide-1 (GLP-1) isa ka cell-type-specific post-translational nga produkto sang proglucagon (Gcg) nga may mga anti-inflammatory properties.28 Subong sang ginapakita sa Figure 7, ang DSS nag-induce sang isa ka daku nga pagnubo sa Gcg mRNA expression. Ang colon kag BLG nga pagbulong mahimo nga makahulugan nga magbaliskad sang DSS-induced Gcc nga ginbuhinan kon ipaanggid sa kontrol nga grupo (Fig. 7A). Sa amo man nga tion, ang lebel sang GLP-1 sa serum nagnubo sing daku sa grupo nga ginbulong sang DSS, kag ang pagbulong sang BLG mahimo nga makapugong sa sini nga pagnubo (Fig. 7B). Sanglit ang mga short-chain fatty acids makapukaw sang GLP-1 secretion paagi sa G-protein-coupled receptor 43 (GRP43) kag GRP-protein receptor (GRP43) 14 pagpaaktibo, gin-usisa man namon ang GPR41 kag GRP43 sa colon sang mga ilaga nga may colitis kag nakita nga ang colonic mRNA expression sang GRP43 kag GPR41 nagnubo sing daku pagkatapos sang DSS challenge, kag ang pagtambal sang BLG epektibo nga makaluwas sa sini nga mga pagnubo (Figure 7C kag D).
Figure 7 Ang BLG nagapataas sang lebel sang serum GLP-1 kag colonic Gcg, GPR41 kag GRP43 mRNA expression sa DSS-treated mice.(A) Gcg mRNA expression sa colon tissue; (B) lebel sang GLP-1 sa serum; (C) GPR41 mRNA nga ekspresyon sa tisyu sang colon; (D) GPR43 mRNA expression sa colon tissue. Ang mga datos ginapresentar bilang mean ± SEM (n = 5–6).#p < 0.05 ukon ##p < 0.01 vs control (Con) nga grupo; *p < 0.05 vs DSS nga grupo.
Sanglit ang pagbulong sang BLG mahimo nga makapataas sang lebel sang serum GLP-1, ekspresyon sang colonic Gcg mRNA, kag lebel sang fecal SCFA sa mga ilaga nga ginabulong sang DSS, gin-usisa pa gid namon ang acetate, propionate, kag butyrate subong man gikan sa kontrol (F-Con), DSS colitis (F-Con) -DSS) kag BLG-treated colitis (F-Con) -DSS) sa mga ilaga nga ginbulong sa GLP-1 gikan sa mga panguna nga murine colonic epithelial cells. Subong sang ginapakita sa Figure 8A, ang mga panguna nga mouse colonic epithelial cells nga gintratar sang 2 mM acetic acid, propionic acid, kag butyric acid, sa pagsunod, nagpukaw sing daku sang pagpaguwa sang GLP-1, nga nagahisanto sa mga nauna nga pagtuon.29,30 Subong man, ang tanan nga FDS-on, F-SG-equivalent, kag F-G-equivalent ( 0.25 g sang mga higko) nagpahulag sing daku sang pagpaguwa sang GLP-1 gikan sa panguna nga mga selula sang epithelial sang colon sang murine. Talalupangdon, ang kadamuon sang GLP-1 nga ginpaguwa sang F-DSS-treated primary mouse colonic epithelial cells mas manubo sangsa F-Con kag F-BLG-treated primary mouse epithelial cells (Ang Pigura B). Ang pagtambal sang BLG nagpabalik sing daku sang produksyon sang GLP-1 nga naghalin sa intestinal SCFA.
Figure 8 Ang BLG-derived SCFA nagapukaw sang GLP-1 nga pagguwa gikan sa panguna nga murine colonic epithelial cells. (A) Ang acetic acid, propionic acid, kag butyric acid nagpukaw sang pagguwa sang GLP-1 gikan sa panguna nga murine colonic epithelial cells; (B) mga fecal extracts F-Con, F-DSS kag F-BLG nga nagpukaw sang panguna nga murine colonic epithelial cells Amount sang GLP-1 nga ginpaguwa. Ang mga aliquot sang colonic epithelial cells ginbutang sa glass-bottom petri dishes kag gintratar sang 2 mM acetic acid, propionic acid, propioric acid, but fecal extract, kag F-Con F-DSS, kag F-BLG (katumbas sa 0.25 g nga higko), sa magkatuhay. 2 ka oras sa 37°C, 5% CO2, sa magkatuhay. Ang kadamuon sang GLP-1 nga ginpaguwa gikan sa panguna nga mga selula sang murine colonic epithelial natukiban paagi sa ELISA. Ang mga datos ginapresentar subong mean ± SEM (n = 3).#p < 0.05 ukon ##p < 0.01 vs. blangko ukon F-C; *p < 0.05 vs. F-DSS.
Mga pagpalip-ot: Ace, acetic acid; Pro, propionic acid; bisan pa, butyric acid; F-Con, fecal extract gikan sa mga ilaga nga kontrol; F-DSS, fecal extract gikan sa mga ilaga nga may colitis; F-BLG, gikan sa BLG-treated colon Fecal extracts sang mga ilaga nga nagapanghubag.
Ginlista sang World Health Organization bilang isa ka refractory nga balatian, ang UC nangin isa ka pangkalibutanon nga katalagman; bisan pa, ang epektibo nga mga pamaagi sa pagtagna, pagtapna, kag pagbulong sang balatian limitado gihapon. Gani, may yara sang dinalian nga kinahanglanon sa pag-usisa kag paghimo sang bag-o nga luwas kag epektibo nga mga estratehiya sa pagbulong para sa UC. Ang mga paghanda sang tradisyonal nga medisina sang China isa ka nagapanaad nga kapilian bangod madamo nga mga paghanda sang tradisyonal nga medisina sang China ang napamatud-an nga epektibo sa pagbulong sang UC sa populasyon sang China sa sulod sang mga siglo kag sila tanan mga biolohiko nga organiko kag natural nga mga materyales nga kalabanan indi makahalalit sa mga tawo kag mga sapat.31,32 Ini nga pagtuon nagatuyo sa pagpangita sang isa ka luwas kag epektibo nga tradisyonal nga paghanda sang medisina sang China para sa pagbulong sang UC kag sa pag-usisa sang mekanismo sang aksyon sini. Ang BLG isa ka kilala nga pormula sang herbal nga Intsik nga ginagamit sa pagbulong sang trangkaso. ang tradisyonal nga produkto sang medisina sang China gikan sa pareho nga hilaw nga materyales subong sang BLG, nagapakita sang daku nga pagkaepektibo sa pagbulong sang UC sa mga tawo kag mga sapat.4,34 Apang, ang mga epekto sang anti-colitis sang BLG kag ang mga epekto sini Ang mekanismo indi maathag. Sa karon nga pagtuon, ang amon mga resulta nagapakita nga ang BLG epektibo nga nagapahaganhagan sang DSS-induced colonic inflammation, nga may kaangtanan sa modulation sang gut microbiota kag pagpanumbalik sang produksyon sang GLP-1 nga naghalin sa tinai.
Nahibaluan gid nga ang UC ginakilala paagi sa pagbalik sang mga panahon nga may tipikal nga mga klinikal nga mga bahin, pareho sang pagbuhin sang timbang, pag-ubo, pagdugo sa rectum, kag malapad nga kahalitan sa colonic mucosal.35 Gani, ang chronic relapsing colitis ginhatag paagi sa paghatag sang tatlo ka siklo sang 1.8% DSS sa sulod sang lima ka adlaw, nga ginsundan sang pito ka adlaw nga pag-inom sang tubig sa mga Pigura. 1B, ang nagabag-obag-o nga pagbuhin sang timbang kag ang mga marka sang DAI nagpakita sang madinalag-on nga pag-induce sang chronic relapsing colitis. Ang mga ilaga sa grupo nga ginbulong sa BLG nagpakita sang upshift recovery halin sa adlaw 8, nga tuhay gid sa adlaw 24. Ang amo man nga mga pagbag-o naobserbahan man sa DAI score, nga nagapakita sang pag-uswag sa klinikal nga pag-uswag sang mga termino sang colitition kag inflammatory injury. ang kalabaon sang colon, ang halit sa tisyu sang colon, kag ang ekspresyon sang gene kag ang produksyon sang proinflammatory cytokines TNF-α, IL-1β, kag IL-6 sa tisyu sang colon nag-uswag man sing daku pagkatapos sang pagbulong sang BLG. Sa kabilugan, ining mga resulta maathag nga nagapakita nga ang BLG epektibo sa pagbulong sang chronic relapsing colitis sa mga ilaga.
Paano ginapatuman sang BLG ang iya mga epekto sa parmakolohiya? Madamo nga mga pagtuon sang una ang nagpakita nga ang gut microbiota may yabi nga papel sa pathogenesis sang UC, kag ang mga terapiya nga nakabase sa microbiome kag microbiome-targeted nagtuhaw bilang isa ka makagalanyat nga estratehiya para sa pagbulong sang UC. Sa karon nga pagtuon, ginpakita namon nga ang BLG nga pagbulong nagresulta sa mga makahulugan nga pagbag-o sa komposisyon sang microbio, nga nagapanugda nga ang komposisyon sang gut microbio ang proteksyon nga epekto sang BLG batok sa DSS-induced colitis may kaangtanan sa modulasyon sang gut microbiota. Ini nga obserbasyon nagasanto sa nosyon nga ang pag-reprogram sang homeostasis sang gut microbiota isa ka importante nga pamaagi sa paghangop sang pagkaepektibo sang mga paghanda sang TCM.36,37 Talalupangdon, ang Akkermansia isa ka Gram-negatibo kag estrikto nga anaerobicus nga nagakabuhi sa layer sang layer tinai, nga nagaguba sang mga mucin, nagapatubas sang propionic acid, nagapahulag sang goblet cell differentiation, kag nagamentinar sang mucosa. function sang barrier integrity.26 Ang madamo nga datos sa klinika kag sapat nagapakita nga ang Akkermansia may kaangtanan gid sa mapagros nga mucosa,38 kag oral nga pagdumala sang Akkermansia spp. makapauswag sing daku sang panghubag sang mucosal.39 Ang amon karon nga datos nagapakita nga ang relatibo nga kadamuon sang Akkermansia labi nga nagdugang pagkatapos sang pagbulong sang BLG. Dugang pa, ang Prevotellaceae_UCG-001 isa ka bakterya nga nagapatubas sang SCFA.27 Madamo nga pagtuon ang nagpakita nga ang Prevotellaceae_UCG-001 nakita sa relatibo nga kadamuon sang mga sapat nga may mga higko colitis.40,41 Ang amon karon nga datos nagapakita man nga ang pagtambal sang BLG makadugang sing daku sang relatibo nga kadamuon sang Prevotellaceae_UCG-001 sa colon sang mga ilaga nga ginabulong sang DSS. Sa kabaliskaran, ang Oscillibacter isa ka mesophilic, estrikto nga anaerobic nga bakterya.42 nagreport nga ang relatibo nga kadamuon sang Occillibacter sa UCG nagdugang sing daku mga ilaga kag positibo nga may kaangtanan sa IL-6 kag IL-1β nga lebel kag mga marka sa patolohiya.43,44 Talalupangdon, ang pagtambal sang BLG nagpanubo sing daku sang relatibo nga kadamuon sang Oscillibacter sa mga higko sang mga ilaga nga ginbulong sang DSS. Talalupangdon, ining mga bakterya nga ginbag-o sang BLG amo ang pinakamapuslanon nga mga epekto sang mga nauna nga pagtuon nga nagapatubas sang SCFAN. Ang mga SCFA sa panghubag sang colonic kag pag-amlig sang integridad sang intestinal epithelial.45,46 Ang amon karon nga datos nakaobserbar man nga ang mga konsentrasyon sang SCFA acetate, propionate, kag butyrate sa mga higko nga ginbulong sang DSS nagdugang sing daku sa mga ilaga nga ginbulong sang BLG. Kon tingbon, ining mga natukiban maathag nga nagapakita nga ang epektibo nga pagbulong sang BLG makapauswag sang DSS SCFA-producing bacteria sa mga ilaga nga may chronic relapsing colitis.
Ang GLP-1 isa ka incretin nga panguna nga ginahimo sa ileum kag colon kag may importante nga papel sa pagpadugay sang pag-empty sang tiyan kag pagpanubo sang postprandial blood glucose.47 Ang ebidensya nagapakita nga ang dipeptidyl peptidase (DPP)-4, isa ka GLP-1 receptor agonist, kag isa ka GLP-1 nanomedicine mahimo nga epektibo nga makapahaganhagan sang panghubag sa tinai As-145. ginreport sa mga nagligad nga pagtuon, ang mataas nga konsentrasyon sang SCFA may kaangtanan sa lebel sang plasma GLP-1 sa mga tawo kag mga ilaga. 52 Ang amon karon nga datos nagapakita nga pagkatapos sang pagbulong sang BLG, ang lebel sang serum GLP-1 kag ang ekspresyon sang Gcg mRNA nagtaas sing daku. Subong man, ang pagtago sang GLP-1 nagtaas sing daku sa mga kultura sang colonic pagkatapos sang pagpukaw paagi sa mga extract sang higko gikan sa mga ilaga nga may colitis nga ginbulong sa BLG kon ipaanggid sa pagpukaw paagi sa mga extract sang higko gikan sa mga ilaga nga ginbulong sa DSS. pagpaguwa sang GLP-1?Gwen Tolhurst et al. nagreport nga ang SCFA makapukaw sang GLP-1 secretion paagi sa GRP43 kag GPR41.29 Ang amon karon nga datos nagapakita man nga ang pagtambal sang BLG nagapataas sing daku sang mRNA nga ekspresyon sang GRP43 kag GPR41 sa colon sang mga ilaga nga ginabulong sang DSS. Ini nga mga datos nagapakita nga ang pagtambal sang BLG makabalik sang SCFA-promoted GLP-1 production paagi sa pag-aktibo sang GRP444444441.
Ang BLG isa ka long-term over-the-counter (OTC) nga bulong sa China. Ang pinakamataas nga ginatugutan nga dosis sang BLG sa mga ilaga sang Kunming amo ang 80g/Kg, kag wala sing naobserbahan nga acute toxicity.53 Sa karon, ang ginarekomendar nga dosis sang BLG (nga wala sing asukar) sa mga tawo amo ang 9-15 g/adlaw (3 ka beses sa isa ka adlaw). Ang amon pagtuon nagpakita nga ang BLG sa 1g/DSS nag-uswag sang relatibo nga colp sa mga ilaga. Ini nga dosis malapit sa dosis sang BLG nga gingamit sa klinika. Nakita man sang amon pagtuon nga ang mekanismo sang aksyon sini ginapatunga, sa dimagkubos sa bahin, sang mga pagbag-o sa gut microbiota, ilabi na ang SCFA-producing bacteria, pareho sang Akkermansia kag Prevotellaceae_UCG-001, sa pagpanumbalik sang gut-derived GLP-derived production. dugang nga pagbinagbinag bilang isa ka potensyal nga terapyutik nga ahente para sa pagbulong sang klinikal nga colitis. Apang, ang eksakto nga mekanismo nga gina-modulate sini ang gut microbiota nagapabilin nga kumpirmahon sang mga ilaga nga kulang sa microbiota kag fecal bacterial transplantation.
Ace, asido nga asetiko; apang, butyric acid; BLG, pandan; DSS, dextran sodium sulfate; DAI, indeks sang aktibidad sang balatian; DPP, dipeptidyl peptidase; FID, detector sang ionization sang siga; F-Con, kontrol sang mga kinuha sang higko sang mga ilaga; F-DSS, mga fecal extract sang DSS colitis nga mga ilaga; F-BLG, mga fecal extracts sang BLG-treated colitis mice; GLP-1, glucagon-like peptide-1; Gcg, glucagon; gas chromatography, gas chromatography; GRP43, G protein-coupled receptor 43; GRP41, G protein-coupled receptor 41; H&E, hematoxylin-eosin; HBSS, Hanks' Balanced Salt Solution ; OTC, OTC; PCA, pag-analisar sang panguna nga bahin; PCoA, pag-analisar sang panguna nga koordinasyon; Pro, propionic acid; SASP, sulfasalazine; SCFA, short-chain fatty acids; Intsik nga medisina, tradisyonal nga Intsik nga medisina; UC, ulcerative colitis.
Ang tanan nga mga protocol sa eksperimento gin-aprubahan sang Animal Ethics Committee sang Peking University Shenzhen-Hong Kong University of Science and Technology Medical Center (Shenzhen, China) suno sa Institutional Guidelines and Animal Regulations (ethics number A2020157).
Ang tanan nga mga tagsulat naghimo sang daku nga kontribusyon sa pagpanamkon kag pagdesinyo, pagkuha sang datos, ukon pag-analisar kag pag-interpretar sang datos; nag-intra sa pag-draft sang artikulo ukon kritikal nga pagrebisar sang importante nga intelektwal nga kaundan; nagsugot nga isumiter ang manuskrito sa karon nga journal; gin-aprubahan sang ulihi ang bersyon para sa pagbalhag; Responsable sa tanan nga aspeto sa trabaho.
Ini nga buluhaton ginsuportahan sang National Natural Science Foundation of China (81560676 kag 81660479), ang una nga klase nga proyekto sang Shenzhen University (86000000210), ang Shenzhen Science and Technology Innovation Committee Fund (JCYJ202103240938102010), kag ang Guangdong Science and Medical Science Research Fund (A2020157 kag A2020272), Guizhou Medical University Pharmacy Guizhou Province Ginpondohan sang Key Laboratory (YWZJ2020-01) kag Peking University Shenzhen Hospital (JCYJ2018009).
1. Tang B, Zhu J, Zhang B, et al.Therapeutic potential sang triptolide bilang isa ka anti-inflammatory agent sa dextran sodium sulfate-induced experimental colitis sa mga ilaga.pre-immune.2020;11:592084.doi: 10.3389/fimmu.20202058.
2. Kaplan GG.Ang pangkalibutanon nga palas-anon sang IBD: halin 2015 tubtob 2025.Nat Rev Gastroenterol Hepatol.2015;12:720–727.doi: 10.1038/nrgastro.2015.150
3. Peng J, Zheng TT, Li Xue, et al.Plant-derived alkaloids: promising disease modifiers in inflammatory bowel disease.Prepharmacology.2019;10:351.doi:10.3389/fphar.2019.00351
4. Xiao Haiteng, Peng Jie, Wen B, et al.Ang Indigo Naturalis nagapugong sang colonic oxidative stress kag Th1/Th17 nga mga sabat sa DSS-induced colitis sa mga ilaga.Oxid Med Cell Longev.2019;2019:9480945.doi: 10.1152/1984/45
5. Chen M, Ding Y, Tong Z. Pagkaepektibo kag kaluwasan sang Sophora flavescens (Sophora flavescens) Chinese herbal medicine sa pagbulong sang ulcerative colitis: klinikal nga ebidensya kag potensyal mechanisms.Prepharmacology.2020;11:603476.doi:10.3389/fphar.2020.603476
6. Cao Fang, Liu Jie, Sha Benxing, Pan HF. Natural nga mga produkto: eksperimento nga epektibo nga mga bulong para sa pagbulong sang inflammatory bowel disease. Curr Pharmaceuticals.2019;25:4893–4913.doi: 10.2174/138161286661615124
7. Zhang C, Jiang M, Lu A. Mga pagpamalandong sa adjuvant nga pagbulong sang ulcerative colitis nga may tradisyonal nga medisina sang China.Clinical Rev Allergy Immunization.2013;44:274–283.doi: 10.1007/s12016-012-8328-9
8. Li Zhongteng, Li Li, Chen TT, et al.Kaepektibo kag kaluwasan sang Banlangen granules sa pagbulong sang seasonal influenza: isa ka pagtuon nga protocol para sa isa ka randomized controlled trial.trial.2015;16:126.doi: 10.1186/s13063-015-064-x55